Screening molecular en Cáncer Pulmón

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Published: 31 May 2014
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Dra Marta Adonis - Instituto de Ciencias Biomédicas, Facultad de Medicina, Universidad de Chile

La Dra. Adonis habla con ecancer en el Congreso Latinoamericano e Oncología Molecular de la Universidad de Chile “CLOMUCH” sobre su ponencia en la detección temprana en cáncer de pulmón, haciendo énfasis a su trabajo en la búsqueda de marcadores moleculares que se relacionen con detección temprana con esta patología.

Mi ponencia estuvo enfocada a la detección temprana de cáncer de pulmón. Nosotros estamos dedicados desde bastantes años a buscar marcadores moleculares que se relacionen con detección de cáncer temprano de pulmón. De verdad la cosa es que nuestra propuesta es que el cáncer de pulmón, la forma certera de atacarlo debería ser a través del diagnóstico temprano. Ojala detectando lesiones pre neoplásicas pre invasoras y no detectando el cáncer en estadios tan avanzados como etapa 3 o etapa 4.

Desde ese punto de vista entonces nuestro trabajo está enfocado a marcadores moleculares del tipo protónico del tipo genómico, que nos permitan llegar tempranamente a lesiones pre-neoplásicas o estadios muy tempranos de la enfermedad que puede ser en situ o en etapa 1 o como máximo en etapa 2.

Mi presentación estuvo entonces enfocada en eso, en mostrar algunos hallazgos que nosotros hemos estado haciendo relacionados con esta área, y lo que yo conté y resumí fue que primero hemos usado tecnologías de punta, que se ha desarrollado en Vancouver en Canadá, en la BC CA, son parte de nuestros partners de colaboración de investigación y trabajo en el área de cáncer de pulmón.

Con ellos hemos estado trabajando en el área de citología automática cuantitativa y con broncoscopia autofluorescente, junto con un marcador tumoral, que es un antígeno tumoral DR70. Nosotros el antígeno tumoral junto con la citología cuantitativa y la broncoscopia autofluorescente acompañado con una encuesta de riesgo de cáncer de pulmón la hemos utilizado como una forma seleccionar de la población con riesgo para cáncer de pulmón o para lesiones preneoplásicas.

Entonces lo primero que hemos hecho ha sido encuestar población sana ya para determinar un riesgo, ya sea por hábito de fumar, posición laboral, exposición ambiental, exposición intradomiciliaria y de esas formas las personas con un riesgo medio alto han sido invitadas a hacerse a realizarse una citología automática cuantitativa un antígeno tumoral DR-70.

Aquellos pacientes que dan un puntaje de riesgo de malignidad medio alto ha sido invitado a hacerse una broncoscopia autofluorescente. En esas personas hemos hecho una broncoscopia autofluorescente encontrando una prevalencia de cáncer de pulmón en esa población de 4%, lo cual no es menor. Hemos encontrado lesiones preneoplásicas del tipo de metaplasia y displasia, leve, moderada y severa.

En todos estos pacientes los pacientes son todos asintomáticos e inicialmente en todo los pacientes los que han resultado con cáncer de pulmón, los que han resultado con lesiones preneoplásicas malignas pre-invasoras o pre-malignas, en pacientes también controles hemos obtenido muestras de DNA, de varias fuentes, de fuentes de esputo inducido. El esputo inducido nosotros lo utilizamos para la citología automática cuantitativa de esputo inducido y también para obtener material genético o DNA para estudios genómicos.

También tenemos material genético para estudios genómicos que provienen de sangre, de sangre total. De esa sangre total nosotros con ella obtenemos dos DNA genómicos, para los estudios genómicos con array ya para hacer plantillas genómicas y entonces identificar fragmentos cromosomales que podrían estar alterados.

De allí de esa muestra de sangre también sacamos sueros, separamos suero, y ese suero lo utilizamos para el marcador tumoral DR70. También de ese suero sacamos DNA circulante libre y en ese material genético de DNA circulante libre así como el DNA total genómico hacemos estudios genómicos para buscar marcadores genómicos de detección temprana de cáncer de pulmón o asociados al cáncer como tal como un apoyo diagnostico a las tecnologías tradicionales como el TAC, tomografía axial computarizada.

Entonces nosotros por una parte nosotros hemos hecho un tamiz, una selección de pacientes a través de encuestas, de citologías automáticas cuantitativas, marcador tumoral. Luego confirmar con broncoscopia fluorescente y con TAC y posteriormente con estudios genómicos con todo este material genético.

En este material genético lo que nosotros estamos estudiando es alteración en el numero copia, estamos buscando fragmentos dentro de zonas cromosomales que pudieran haberse perdido o deletado, o haber sido aumentadas. Entonces que se traduzcan en ganancias de fragmentos de DNA o pérdidas de fragmentos de DNA.

En esos fragmentos de DNA hay muchos genes. Entonces lo que nosotros hemos hecho es, primero fue hacer un array tratando de buscar si en los cromosomas existen en alteración de número de copias, si existen perdidas de lesiones o ganancias de fragmentos cromosomales asociadas a cáncer de pulmón o lesiones preneoplásicas y la verdad es que hemos encontrado hallazgos bien interesantes de fragmentos que se pierden o se ganan en ciertos cromosomas como el cromosoma o fragmento 3Q29, que es un fragmento que ha sido por algunos doctores descrito asociado a cáncer.

Nosotros lo hemos encontrado en un 70% de cáncer del tipo escamoso y un 59% de cáncer de pulmón del tipo adenocarcinoma. Está presente esta pérdida de fragmento, de esta alteración de número de copias de 3Q29 que es un ejemplo.

Pero también hemos encontrado otras alteraciones de ganancia y perdida en otros cromosomas, en muestras de DNA total, que es el DNA genómico y de allí entonces salen algunos estudiar, algunos genes puntuales, y dentro de esos fragmentos que se ganan o se pierden, de manera o con el objetivo de ir a buscar genes que podrían marcar una susceptibilidad a cáncer de pulmón, y que nosotros después lo pudiéramos buscar entonces esas alteraciones de esos genes lo pudiésemos buscar en muestras de sangre con el objetivo de tener un marcador genómico en una muestra de sangre y de una metodología no invasora.

Lo otro también hemos hecho exactamente lo mismo pero muestras de esputo ya inducido y también en DNA circulante libre, que es un DNA que es extracelular, está fuera de la célula, y este DNA circulante libre son pequeños fragmentos y este DNA circulante libre ha sido asociado a algunos tipos de cáncer, pero no ha sido tan estudiado con cáncer de pulmón.

Nosotros lo hemos estado estudiando en cáncer de pulmón. Es un DNA de pequeño tamaño. Son fragmentos extracelulares que no está bien claro el origen de este DNA circulante libre, pero se cree que viene de zonas tumorales, de células tumorales productos de apoptosis, es decir, de muerte celular programada de estas células tumorales y también necrosis, que es una parte de la muerte de esta célula, y que de esa forma, ya sea por necrosis, o por apoptosis este DNA circulante libre sale a torrentes sanguíneos y viaja a distintos tejidos y circula y por tanto es posible determinarlo.

Para algunos tipos de cáncer se ha ensayado la determinación de este DNA circulante libre pero no ha sido tan bien estudiado en cáncer de pulmón. Nosotros lo hemos estudiado y hemos encontrado hallazgos bien interesantes que nos dan cuenta de que el DNA circulante libre está presente en concentraciones estadísticamente más alta en pacientes con cáncer de pulmón versus individuos que no tienen la enfermedad.

Sin embargo no hemos encontrado las mismas revelaciones para lesiones preneoplásicas invasoras. Es decir, no hay una diferencia significativa en la concentración de DNA circulante libre entre individuos con lesiones preneoplásicas o pre invasoras y pacientes que son controles, es decir, libres de la enfermedad.

Esto podría estar relacionado en que el DNA circulante libre, como lo había dicho previamente, probablemente proviene de procesos como apoptosis o necrosis, o desde zonas tumorales. Por lo tanto por tratarse de la lesión preneoplásicas, de lesiones muy iniciales probablemente no está sufriendo este proceso marcado que ocurre en las células tumorales y que estamos teniendo estos niveles tan considerables circulantes de DNA en pequeños fragmentos, y por eso no hemos tenido esta diferencia tan significativa.


Ahora esto nos sugiere que el DNA circulante libre podría ser una buena herramienta ya de diagnóstico como herramienta complementaria de cáncer de pulmón. Junto con otros marcadores como la citología automática cuantitativa que nosotros estamos usando con el marcador tumoral DR70 que todos apoyan al diagnóstico y las herramientas tradicionales como la tomografía.

También dentro de este DNA circulante libre que fue lo que yo mostré ayer hemos encontrado hallazgos genómicos bien importantes. Hemos encontrado algunos fragmentos en el cromosoma 7, en el cromosoma 11, en el cromosoma 17 y en el cromosoma 2. Ya hemos encontrado perdida de algunos fragmentos en esos cromosomas y hemos hecho un análisis funcional de los genes que podrían estar asociados a fragmentos que se han perdido y que podrían estar asociados a la patología de cáncer de pulmón.

Hemos encontrado principalmente que los genes que están asociados a esos fragmentos que se pierden están relacionados con procesos inflamatorios, están relacionados con procesos de evasión del ciclo celular, están relacionados con el que las células, en el que viaje de un tejido a otro, con transporte desde un lado a otro.

También hemos encontrado los genes que están relacionados con transportes de droga y ya con resistencia a droga lo cual entonces nos está siendo ver que este DNA, estos hallazgos genómicos que nosotros hemos encontrado en DNA circulante libre, nos hacen ver que no solamente el DNA circulante libre en términos de concentración, determinarlo de su presencia de cómo esta, podría ser una herramienta prometedora en el diagnóstico de cáncer de pulmón.

También hay algo genómico dentro de este DNA circulante libre, es decir, este DNA circulante libre no es solo concentración sino que también tienen marcadores genómicos que podrían ser importantes en el diagnóstico de cáncer de pulmón.

Todo esto en términos ya de pensar que la prevención, es decir, identificar poblaciones susceptibles a cáncer de pulmón es uno de los pasos importantes para mejorar la sobrevida a 5 años de los pacientes con cáncer de pulmón.

Por otra parte la detección temprana, es decir, todos estos biomarcadores, sean del tipo proteómico, ya sean citológicos, como la citología automática o imageniologia, como es la broncoscopia autofluorescente, junto con los biomarcadores genómicos podrían ayudar, no solamente a identificar a las zonas de riesgo, en términos de susceptibilidad a tener la enfermedad, sino que también podrían ayudarnos a llegar tempranamente al diagnóstico de la enfermedad. Sin tener que pensar que tenemos que tener un paciente en estado avanzado sintomático de síntomas para hacer el diagnóstico.

Nosotros estamos convencidos del diagnóstico cuando un paciente consulta por síntomas ya es tarde. Si seguimos apuntando al diagnóstico tardío, esperar que el paciente concurra a la consulta para aclarar un síntoma o síntomas específicos que está teniendo, ya es tarde y no es el camino para aumentar la sobrevida a cinco años de cáncer de pulmón.

Nosotros estamos convencidos que el camino está en identificar a las poblaciones de riesgo y en ellos hacer prevención de diagnóstico temprano. Para ello nosotros pensamos que necesitamos herramientas complementarias no invasoras de menor costo que una tomografía o que un procedimiento de imageniologia.

Nosotros pensamos que los marcadores en sangre, en esputo, pueden ser vía, para no solo abaratar costo, sino que por ende llegar a mayor cantidad de población y poder hacer screening de diagnóstico temprano. Eso fue lo que yo ayer más o menos conté y resumí en la presentación que hice en el día de ayer.